产品名称:ABzol™
别名:RNA保存液(RNA preservative)、RNA稳定和储存溶液、RNA酶抑制剂(RNase Inhibitor),RNA抽提液
产品说明:
ABzol™ 试剂是一款即用型试剂,可从多种生物样品中分离高质量总总 RNA、转录组 RNA、micro RNA,用于保存RNA样本,和在一小时内从人、动物、植物、酵母或细菌来源的细胞和组织样品中分离出RNA。本产品含有目前强力高效的RNA酶抑制剂,它在裂解组织的同时也使RNA酶失活,它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来,又对RNA酶有强烈的变性作用,同时具有裂解细胞、释放核酸的作用,可以快速的保护细胞内的RNA不被降解,从而可保持RNA的完整性。
标本放入保存液后常温保存和运输,至少一周RNA不变,避免低温运输带来的不便和成本,高效低成本保存运输样本。冷冻条件下可以长期保存病毒RNA不降解
作为保存或储存样本功能,其可迅速渗透到组织内以稳定和保护细胞的RNA。使用ABzol™溶液便不再需要立即处理组织样本,亦无须将样本在液氮中冷冻待随后处理。收集组织块或微生物试子、离心沉淀物浸没于ABzol™溶液中保存,就完好保存后续RNA提取过程中获得的RNA的品质和数量。
作为RNA抽提功能,ABzol™ 采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法,抽提的方法和步骤完全相同。试剂可很好地处理少量组织和细胞以及大量组织和细胞。
ABzol™ 试剂的主要特点:
1. RNA保存和提取双功能;
2. RNase含量丰富的组织即时RNase灭活;
3. 广谱应用于组织、细胞、血清、病毒和细菌的RNA保存;
4. 瞬时完全灭活微生物毒性和感染性,安全性高;
5. 需提采集多个样本,且采集时间、空间跨度较大;
6. 无须液氮和冷冻保存。适合于不方便马上提取RNA而又没有液氮或超低温冰箱保存样品;
7. 与各种分析试剂盒兼容性好,不影响PCR扩增效果;
8. 拥有出色的裂解能力,甚至可处理困难的样品类型;
9. 与大多数RNA分离操作(包括所有的AmbionRNA分离试剂盒)兼容;
10. 室温下或只用冰的条件下长途运输样品;
适用于(应用):
实时荧光定量 PCR (qPCR),逆转录酶 PCR (RT-PCR),cDNA 文库构建,核酸酶保护测定,克隆。
货号 | 品名 | 规格 | 单位 | 单价(元) | 备注 |
R013-100ML | RNA保存液 | 100ml | 瓶 | 280 | |
R013-500ML | RNA保存液 | 500ml | 瓶 | 1200 |
使用方法:
一、样本RNA保存:
1、组织样本:将组织块切成每边不超过0.5 cm的小块(如样品为骨头,需打碎成小块),在室温下浸没于5-10倍体积的RNA样本保存液中即可;
2、微生物/培养细胞:离心收集菌体/培养细胞,室温下加入离心后体积的5-10倍RNA样本保存液中即可;
3、血液样本:将血液样本用红细胞裂解液处理后,离心收集白色或淡红色沉淀,室温下加入沉淀体积的5-10倍RNA样本保存液中即可。
二、RNA抽提:
1、细胞裂解:
组织样本:ABzol用量:每 50-100 mg 组织加 1 ml ABzol,样品体积不应超过ABzol 体积的 10%。
(1)将动物或植物组织切成小块,在液氮中磨碎或用匀浆器匀浆处理。
(2)将研磨好的组织粉末快速转入装有 1 ml ABzol 的 2 ml 离心管中,在涡旋振荡器上迅速振荡混匀,置于冰上, 待所有的样品研磨完。
(3)裂解产物应呈澄清的透明粘稠液体。对于富含蛋白、脂肪或多糖物质的组织样品如肌肉、脂肪组织和植物结节部位等,匀浆后仍会存留有不溶物质,可于 4℃ 12,000 x g 离心 10 min,然后吸取上清至一新的离心管中。
细胞样本:
(1)贴壁细胞:吸尽培养液,每 10 cm2培养面积(6 孔板单孔或 35 mm 平皿)加入 1 ml ABzol,用加样器吹打数次,以确保细胞完全裂解,然后转移至离心管中。 注:Trizol 的使用量应由培养皿表面 积决定,而非由细胞数目决定。Trizol 量不足可能导致提取的 RNA 中有 DNA 污 染 。
(2)悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,每 5-10×106动植物或酵母细胞,或每 1×107细菌细胞加入 1mlABzol, 用加样器吹打,使其完全裂解,然后转移至离心管中。 注:添加ABzol 前切勿洗涤细胞 ,以免 RNA 降解。必要时可以用匀浆器来裂解某些细菌或者酵母细胞 。
2、液相分离:
(1)裂解产物于室温放置 5 min,使核酸-蛋白复合物完全分离。(注:此时样品可在-80℃长期保存。 )
(2)每 1 mlABzol 加入 0.2 ml 氯仿,盖紧管盖,剧烈振荡 15 s,室温放置 2-3 min。
(3)4℃ 12,000 x g 离心 15 min,样品会分成三层:桔黄色的下层有机相,中间层和无色的上层水相。
(4)吸取含总 RNA 的上层水相至一新的离心管中,吸取水相的体积为所用ABzol 试剂的 60%。
3、RNA 回收
(1)按照每 1 ml ABzol 的*初使用量加入 0.5 ml 异丙醇,颠倒数次混匀,室温放置 10 min。
(2) 4℃ 12,000 x g 离心 10 min,弃除上清,可见胶状的 RNA 沉淀。
(3)按照每 1 ml ABzol 的*初使用量加入 1 ml 75%乙醇,颠倒数次混匀,洗涤沉淀。
(4)4℃ 12,000 x g 离心 5 min,弃除上清。
(5)室温倒置 5-10 min 晾干或真空抽干(不要使用真空干燥离心机,以免 RNA 过干,难以溶解)。
(6)加入适量(如 25ul) DEPC-ddH2O 或 TE 缓冲液,用加样器吹打数次溶解 RNA。
(7)通过 RNA 电泳以及紫外分光光度计检测,确定 RNA 的浓度、纯度和完整性。
(8)所得的 RNA 应立即使用或适量分装后-80℃保存,避免反复冻融。
注意事项:
1.RNA样本保存液如出现沉淀,37℃加热振荡混匀。
2.加入RNA样本保存液后,样本不能立即置于-20℃或-80℃,要先4℃置放过夜,待组织充分浸润后再置于低温保存。
3.样品浸没在RNA样本保存液中,可在37℃保存1天,25℃保存1周,4℃保存1个月,-20℃长期保存;使用时请注意保存时限。
4.保存在RNA样本保存液中的样本可不经特殊处理,离心或直接使用和新鲜组织一样的RNA提取方法提取RNA。
5.RNA样本保存液可以配合各种常见的RNA提取试剂盒使用,如东盛、invitrogen、omega等公司出品的RNA提取试剂盒,不影响试剂盒操作,不影响提取所得RNA质量及其后续实验。
储存与运输:
4℃避光密闭保存,保质期12个月。
提示:
1. 我司所销售的化学试剂、原料等所有产品(包括但不限于抗生素类、蛋白质类、试剂盒类产品等)仅限用于科学研究用途,请勿用于人体,不得用于人体的诊疗活动、医药和食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
提示:
1. 本试剂仅用于科研,不可用于任何其他用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
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ABD,您身边的病理学专家!
我们只做病理!
产品名称:ABzol™
别名:RNA保存液(RNA preservative)、RNA稳定和储存溶液、RNA酶抑制剂(RNase Inhibitor),RNA抽提液
产品说明:
ABzol™ 试剂是一款即用型试剂,可从多种生物样品中分离高质量总总 RNA、转录组 RNA、micro RNA,用于保存RNA样本,和在一小时内从人、动物、植物、酵母或细菌来源的细胞和组织样品中分离出RNA。本产品含有目前强力高效的RNA酶抑制剂,它在裂解组织的同时也使RNA酶失活,它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来,又对RNA酶有强烈的变性作用,同时具有裂解细胞、释放核酸的作用,可以快速的保护细胞内的RNA不被降解,从而可保持RNA的完整性。
标本放入保存液后常温保存和运输,至少一周RNA不变,避免低温运输带来的不便和成本,高效低成本保存运输样本。冷冻条件下可以长期保存病毒RNA不降解
作为保存或储存样本功能,其可迅速渗透到组织内以稳定和保护细胞的RNA。使用ABzol™溶液便不再需要立即处理组织样本,亦无须将样本在液氮中冷冻待随后处理。收集组织块或微生物试子、离心沉淀物浸没于ABzol™溶液中保存,就完好保存后续RNA提取过程中获得的RNA的品质和数量。
作为RNA抽提功能,ABzol™ 采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法,抽提的方法和步骤完全相同。试剂可很好地处理少量组织和细胞以及大量组织和细胞。
ABzol™ 试剂的主要特点:
1. RNA保存和提取双功能;
2. RNase含量丰富的组织即时RNase灭活;
3. 广谱应用于组织、细胞、血清、病毒和细菌的RNA保存;
4. 瞬时完全灭活微生物毒性和感染性,安全性高;
5. 需提采集多个样本,且采集时间、空间跨度较大;
6. 无须液氮和冷冻保存。适合于不方便马上提取RNA而又没有液氮或超低温冰箱保存样品;
7. 与各种分析试剂盒兼容性好,不影响PCR扩增效果;
8. 拥有出色的裂解能力,甚至可处理困难的样品类型;
9. 与大多数RNA分离操作(包括所有的AmbionRNA分离试剂盒)兼容;
10. 室温下或只用冰的条件下长途运输样品;
适用于(应用):
实时荧光定量 PCR (qPCR),逆转录酶 PCR (RT-PCR),cDNA 文库构建,核酸酶保护测定,克隆。
货号 | 品名 | 规格 | 单位 | 单价(元) | 备注 |
R013-100ML | RNA保存液 | 100ml | 瓶 | 280 | |
R013-500ML | RNA保存液 | 500ml | 瓶 | 1200 |
使用方法:
一、样本RNA保存:
1、组织样本:将组织块切成每边不超过0.5 cm的小块(如样品为骨头,需打碎成小块),在室温下浸没于5-10倍体积的RNA样本保存液中即可;
2、微生物/培养细胞:离心收集菌体/培养细胞,室温下加入离心后体积的5-10倍RNA样本保存液中即可;
3、血液样本:将血液样本用红细胞裂解液处理后,离心收集白色或淡红色沉淀,室温下加入沉淀体积的5-10倍RNA样本保存液中即可。
二、RNA抽提:
1、细胞裂解:
组织样本:ABzol用量:每 50-100 mg 组织加 1 ml ABzol,样品体积不应超过ABzol 体积的 10%。
(1)将动物或植物组织切成小块,在液氮中磨碎或用匀浆器匀浆处理。
(2)将研磨好的组织粉末快速转入装有 1 ml ABzol 的 2 ml 离心管中,在涡旋振荡器上迅速振荡混匀,置于冰上, 待所有的样品研磨完。
(3)裂解产物应呈澄清的透明粘稠液体。对于富含蛋白、脂肪或多糖物质的组织样品如肌肉、脂肪组织和植物结节部位等,匀浆后仍会存留有不溶物质,可于 4℃ 12,000 x g 离心 10 min,然后吸取上清至一新的离心管中。
细胞样本:
(1)贴壁细胞:吸尽培养液,每 10 cm2培养面积(6 孔板单孔或 35 mm 平皿)加入 1 ml ABzol,用加样器吹打数次,以确保细胞完全裂解,然后转移至离心管中。 注:Trizol 的使用量应由培养皿表面 积决定,而非由细胞数目决定。Trizol 量不足可能导致提取的 RNA 中有 DNA 污 染 。
(2)悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,每 5-10×106动植物或酵母细胞,或每 1×107细菌细胞加入 1mlABzol, 用加样器吹打,使其完全裂解,然后转移至离心管中。 注:添加ABzol 前切勿洗涤细胞 ,以免 RNA 降解。必要时可以用匀浆器来裂解某些细菌或者酵母细胞 。
2、液相分离:
(1)裂解产物于室温放置 5 min,使核酸-蛋白复合物完全分离。(注:此时样品可在-80℃长期保存。 )
(2)每 1 mlABzol 加入 0.2 ml 氯仿,盖紧管盖,剧烈振荡 15 s,室温放置 2-3 min。
(3)4℃ 12,000 x g 离心 15 min,样品会分成三层:桔黄色的下层有机相,中间层和无色的上层水相。
(4)吸取含总 RNA 的上层水相至一新的离心管中,吸取水相的体积为所用ABzol 试剂的 60%。
3、RNA 回收
(1)按照每 1 ml ABzol 的*初使用量加入 0.5 ml 异丙醇,颠倒数次混匀,室温放置 10 min。
(2) 4℃ 12,000 x g 离心 10 min,弃除上清,可见胶状的 RNA 沉淀。
(3)按照每 1 ml ABzol 的*初使用量加入 1 ml 75%乙醇,颠倒数次混匀,洗涤沉淀。
(4)4℃ 12,000 x g 离心 5 min,弃除上清。
(5)室温倒置 5-10 min 晾干或真空抽干(不要使用真空干燥离心机,以免 RNA 过干,难以溶解)。
(6)加入适量(如 25ul) DEPC-ddH2O 或 TE 缓冲液,用加样器吹打数次溶解 RNA。
(7)通过 RNA 电泳以及紫外分光光度计检测,确定 RNA 的浓度、纯度和完整性。
(8)所得的 RNA 应立即使用或适量分装后-80℃保存,避免反复冻融。
注意事项:
1.RNA样本保存液如出现沉淀,37℃加热振荡混匀。
2.加入RNA样本保存液后,样本不能立即置于-20℃或-80℃,要先4℃置放过夜,待组织充分浸润后再置于低温保存。
3.样品浸没在RNA样本保存液中,可在37℃保存1天,25℃保存1周,4℃保存1个月,-20℃长期保存;使用时请注意保存时限。
4.保存在RNA样本保存液中的样本可不经特殊处理,离心或直接使用和新鲜组织一样的RNA提取方法提取RNA。
5.RNA样本保存液可以配合各种常见的RNA提取试剂盒使用,如东盛、invitrogen、omega等公司出品的RNA提取试剂盒,不影响试剂盒操作,不影响提取所得RNA质量及其后续实验。
储存与运输:
4℃避光密闭保存,保质期12个月。
提示:
1. 我司所销售的化学试剂、原料等所有产品(包括但不限于抗生素类、蛋白质类、试剂盒类产品等)仅限用于科学研究用途,请勿用于人体,不得用于人体的诊疗活动、医药和食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
提示:
1. 本试剂仅用于科研,不可用于任何其他用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
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ABD,您身边的病理学专家!
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